重组产毒多杀性巴氏杆菌毒素PMT的N-端和C-端蛋白的生物学活性及免疫原性

摘要：

将5个toxA基因片段N1518、C2345、N3172、N3388和C2115分别克隆到合适的原核表达载体pET-28a(b,c)系统,其中pET28a-N1518和pET28b-C2115在大肠杆菌成功表达,获得大小分别为57kDa和78kDa的融合蛋白rPMT-N和rPMT-C,Western blot检测证实两种表达产物均具有反应原性.分别以200μg rPMT-N和rPMT-C对小白鼠进行体内生物学活性试验,结果两种表达蛋白均不能致死小白鼠;体外细胞毒性试验证实896ng/mL的rPMT-N能使Veto细胞发生病变,而rPMT-C对Veto细胞无明显毒性作用.将rPMT-N和rPMT-C制成亚单位疫苗,同时设天然PMT及无菌PBS对照组,间隔2周分2次皮下免疫小白鼠.二免后2周用8.2×105 CFU的HN-13株T+Pm进行腹腔攻毒,结果rPMT-N组保护率为90.0%(9/10),rPMT-C组保护率为50.0%(5/10),天然PMT组保护率为80.0%(8/10).综上试验表明,rPMT-N具有良好的生物学活性和免疫原性,可作为PAR疫苗添加成分,显示了良好的应用前景.

关键词：产毒多杀性巴氏杆菌、PMT、亚克隆、生物学活性、免疫原性

所属期刊栏目：48

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金30471292;湖北省科技攻关项目2001AA201

在线出版日期：2008-05-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：213-219