遗传稳定型六六六、多菌灵降解基因工程菌构建

摘要：

通过PCR的方法从六六六降解菌Sphingomonas sp.BHC-A扩增出完整的脱氯化氢酶基因linA.将其克隆到含有mini-Tn5的自杀性质粒pUT4K上,构建成质粒pUT/mini-Tn5-linA.通过三亲杂交,在辅助质粒RK600的帮助下,将pUT/mini-Tn5-linA转移到一株高效降解多菌灵菌株Rhodococcus sp.DJL-6中.利用mini-Tn5的转座作用将linA基因整合到DJL-6的染色体DNA上,得到工程菌株DJL-6A.该工程菌具有同时降解多菌灵和六六六的功能,且对于初始浓度为0.05 μg/mL和5 μg/mL的六六六的降解活性与亲本菌株BHC-A相当.在不加任何选择压力的条件下工程菌株进行连续传代,结果证明linA基因可以持续稳定的存在于宿主的染色体DNA上.

关键词：脱氯化氢酶基因linA、转座载体pUT/mini-Tn5、多功能工程菌

所属期刊栏目：48

分类号：Q938(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金40471073;30400013;国家高技术研究发展计划863计划2003AA241150;2004AA246070;2004249;2004514;江苏省高技术研究发展计划项目BE2002345;BE2003343;JHZD06-2;BG2005322

在线出版日期：2008-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：45-50