大肠杆菌Ee株SLT-ⅡeB基因的3拷贝融合表达及其生物学活性与免疫原性

摘要：

根据大肠杆菌Ee株主要免疫原性片段SLT-ⅡeB的基因序列,设计合成两对引物,利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)表达系统将三拷贝SLT-ⅡeB的融合基因串联于GST下游,并在大肠杆菌中成功表达,获得了大小约为45kDa融合蛋白GST-3B,表达产物以包涵体形式产生,Western blot检测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性;结合抑制试验表明,与单拷贝融合表达蛋白GST-B相比,GST-3B与水肿毒素受体的亲和力更强.GST-3B及GST-B与等量弗氏不完全佐剂乳化后制成亚单位疫苗,间隔两周两次皮下免疫小鼠.结果GST-3B疫苗组产生的抗体水平明显高于GST-B疫苗组,但两种疫苗组的抗体消长趋势相同.二免后两周用5×LD50的Ee株大肠杆菌进行腹腔攻毒.GST-3B疫苗组保护率为60.0%(6/10),明显优于GST-B疫苗组40.0%(4/10).研究结果表明GST-3B具有良好的生物学活性和免疫原性,可以作为疫苗添加成分,显示了良好的应用前景.

关键词：大肠杆菌、SLT-ⅡeB基因、融合表达、生物学活性、免疫原性

所属期刊栏目：47

分类号：Q78;Q939(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2006AA10A206;湖北省科技攻关项目2006AA202

在线出版日期：2007-09-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：686-691