耐辐射奇球菌dps突变株的构建和蛋白功能初步研究

摘要：

Dps(DNA protection during starvation)蛋白是原核生物中特有的一类具有铁离子结合和抗氧化损伤功能的重要蛋白.利用体外PCR扩增技术和体内同源重组方法,获得了耐辐射奇球菌(Deinococcus radiodurans)dps全基因(DRB0092)缺失突变株.对突变株和野生型分别进行不同浓度过氧化氢(H2O2)处理,结果表明:与野生型菌株R1相比,dps突变株在低浓度H2O2(≤10mmol/L)条件下存活率急剧下降,而高浓度(≥30mmol/L)下则完全致死.Native-PAGE活性染色结果显示,稳定生长期s突变株体内两种过氧化氢酶(KatA和KatB)的活性较野生型R1分别上调2.3倍和2.6倍.通过质粒构建和大肠杆菌诱导表达,获得可溶性Dps蛋白.体外结合和DNA保护实验结果显示:Dps具有明显的DNA结合功能,并能保护质粒DNA免受羟自由基攻击.本研究证明,Dps蛋白在耐辐射奇球菌抗氧化体系中发挥重要作用,可能对该菌极端抗性机制有重要贡献.

关键词：耐辐射奇球菌、dps突变株、抗氧化、Dps蛋白、DNA保护

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分类号：Q936(微生物学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2004CB19604;国家自然科学基金30330020;国家自然科学基金30425038

在线出版日期：2007-09-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：610-615