南极深海底泥中度嗜盐菌盐单胞菌属Nj223 ectC基因的克隆表达及ectoine合成酶性质分析

摘要：

从南极深海底泥中筛选得到一株中度嗜盐菌 Halomonas sp.Nj223,利用PCR技术,以该菌株基因组为模板,扩增出 ectC 基因.将目的基因的PCR扩增产物克隆至表达载体pET-his.经酶切、PCR鉴定、测序验证结果表明,目的基因插入的位置、大小和读码框均正确,表达载体构建成功.经SDS-PAGE分析,出现预期大小的目的蛋白条带.分离纯化复性的ectoine合成酶后测定其酶活力,在体外验证了ectoine的部分生物合成途径.进一步分析了pH和温度对酶活的影响发现,该酶最适pH为8.0,最适温度为25℃.

关键词：相容性溶质、四氢嘧啶、ectC基因、ectoine合成酶、pET-his-ectC

所属期刊栏目：47

分类号：Q93(微生物学)

资助基金：大洋专项DY105-04-02-06

在线出版日期：2007-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：363-365