共表达猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒NJ-a株ORF4、ORF5与ORF6基因重组改良型痘苗病毒安卡拉株的构建

摘要：

为探讨共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒 (Porcine reproductive and respiratory syndrome Virus , PRRSV)保护性抗原基因的重组改良型痘苗病毒安卡拉株 (Modified Vaccinia Virus Ankala , MVA)的免疫效力, 将PRRSV NJ-a株ORF4、ORF5 和ORF6 基因插入转移载体pⅡLR中, 获得了三基因共表达的转移载体pⅡLR-ORF5/ORF6/ORF4, 通过同源重组的方法获得重组病毒rMVA-GP5/M/GP4.以lacZ为报告基因进行噬斑筛选和重组病毒纯化后, PCR方法证明ORF4、ORF5和ORF6成功的插入MVA基因组中; 经Western blot 检测与间接免疫荧光试验证实, 重组病毒感染细胞能正确表达PRRSV GP4、GP5与 M蛋白.用rMVA-GP5/M/GP4免疫6周龄Babl/C小鼠, 首免后3周可检测到特异性PRRSV 中和抗体, 8周后中和抗体效价可达25, 并能继续维持4周; 淋巴细胞增殖试验结果表明, 重组病毒免疫小鼠产生强烈的特异性细胞增殖反应.上述研究结果表明rMVA-GP5/M/GP4具有良好的免疫原性, 可作为预防PRRS的候选疫苗进一步研究.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒、修饰的痘苗病毒安卡拉株、GP4、GP5与M蛋白、共表达

所属期刊栏目：47

分类号：S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)

在线出版日期：2007-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：345-349