谷氨酸棒杆菌/大肠杆菌穿梭型启动子探测载体构建

摘要：

从质粒pXZ10145和pUC19出发,构建了一个谷氨酸棒杆菌/大肠杆菌穿梭载体pAK6.pAK6的大小为5684bp,带有卡那霉素和氨苄青霉素抗性选择标记,以及多克隆位点.在pAK6基础上,构建了以氯霉素乙酰转移酶为报告基因的启动子探测载体pAKC6,pAKC6的大小为6474bp.采用鸟枪法,将经 Sau 3AI消化的谷氨酸棒杆菌基因组片段连入pAKC6;根据谷氨酸棒杆菌对氯霉素的抗性,从中分离出两个具有启动子功能的插入片段.通过测定报告基因氯霉素乙酰转移酶的活性,对两个启动子片段在谷氨酸棒杆菌中的强度进行了初步的判断;测序后,用启动子预测软件对其结构进行了预测,证实了启动子序列的存在.

关键词：谷氨酸棒杆菌、大肠杆菌、穿梭载体、启动子探测载体

所属期刊栏目：47

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2007-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：191-196