来源于柠檬酸杆菌的高比活植酸酶基因在毕赤酵母中的高效表达

摘要：

柠檬酸杆菌(Citrobacter braakii)来源的植酸酶是目前报道的比活最高的植酸酶.按照毕赤酵母(Pichia pastoris)对密码子的选择偏向性,对来源于柠檬酸杆菌的高比活植酸酶基因AppA 进行了密码子优化改造.改造后的基因AppA(m)按正确的阅读框架融合到毕赤酵母表达载体pPIC9的α-因子信号肽编码序列3′端,通过电击转化得到重组转化子.通过PCR验证,AppA(m)已整合在酵母染色体上.SDS-PAGE分析和表达产物的研究表明,植酸酶得到了高效分泌表达,在5L发酵罐中植酸酶蛋白表达量达到3.2mg/mL发酵液,发酵效价达到每毫升发酵液1.4×107IU以上,高于目前报道的各种植酸酶基因工程菌株的发酵效价.

关键词：高比活植酸酶、基因改造、毕赤酵母、高效表达

所属期刊栏目：46

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2003AA214030

在线出版日期：2006-12-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：945-950