10.3321/j.issn:0001-6209.2006.06.016
RNA聚合酶σ38亚基缺失对假单胞菌抗生物质合成代谢的影响
设计引物从假单胞菌M18基因组DNA中扩增并获得rpoS基因的378bp保守区段.以此为探针,从假单胞菌基因组文库中克隆了包括rpoS基因全序列及其相邻序列的3.1kb EcoRⅠ-XhoⅠ片段.通过抗性基因(抗庆大霉素基因)的定点插入构建了σ38亚基缺失突变株M18S.HPLC检测结果显示,σ38亚基缺失引起该菌株的抗生物质合成代谢的显著变化.与野生株相比,缺失突变株的吩嗪-1-羧酸在PPM和KMB中2种培养基中合成量由58μg/mL和10.2μg/mL分别减少到20.4μg/mL和0μg/mL;而缺失突变株的藤黄绿脓菌素则相反,在PPM和KMB两种培养基中合成量由0.5μg/mL和20.5μg/mL分别提高到75.4μg/mL和185.6μg/mL.表明σ38亚基可区别性调控假单胞菌M18的抗生物质合成代谢.rpoS基因的互补实验和两种抗生素基因与β-半乳糖苷酶基因的翻译融合表达实验进一步验证了上述的结果: σ38亚基正调控吩嗪-1-羧酸的表达,而负调控藤黄绿脓菌素的表达.
假单胞菌M18、藤黄绿脓菌素、吩嗪-1-羧酸、σ38亚基、缺失
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Q93(微生物学)
国家自然科学基金30370041;江苏省高校自然科学基金05KJB180010;鲁东大学校科研和教改项目20063302
2006-12-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
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