HPV16L1核浆运输的动力学过程

摘要：

利用增强型绿色荧光蛋白(Enhance green flurenscent protein,EGFP)标记不同的截短型HPV16L1蛋白(Human papillomavirus type 16 L1protein,HPV16 L1),分析HPV16L1蛋白核定位信号(Nucleus location signal, NLS)的作用.构建重组pFB-EGFP、pFB-EGFP-HPV16L1、pFB-EGFP-HPV16L1△NLS和pFB-EGFP-NLSHPV16L1p转移载体;在DH10Bac宿主菌内经Tn7转座子介导的同源重组后转染Sf-9细胞,获得重组Ac-EGFP、Ac-EGFP-HPV16L1、Ac-EGFP-HPV16L1△NLS和Ac-EGFP-NLSHPV16L1杆状病毒,感染Sf-9昆虫细胞表达相应截短型HPV16L1融合蛋白;利用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察不同融合蛋白的荧光特性和核浆转运动力学过程.结果发现Ac-EGFP杆状病毒感染的Sf-9细胞内明亮的绿色荧光均匀分布;重组Ac-EGFP-HPV16L1和Ac-EGFP-NLSHPV16L1杆状病毒感染的Sf-9细胞,明亮的绿色荧光主要位于细胞核内;重组Ac-EGFP-HPV16L1△NLS杆状病毒感染的Sf-9细胞,绿色荧光局限于细胞浆内,细胞核内无绿色荧光.说明HPV16L1蛋白羧基端的23个氨基酸(GKRKATPTTSSTSTTAKRKKRKL)具有完全核定位作用,能引导HPV16 L1蛋白和EGFP突破核膜屏障进入Sf-9细胞核内.

关键词：人乳头瘤病毒16型、核定位信号、核浆运输、增强型绿色荧光蛋白

所属期刊栏目：46

分类号：Q93(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金30300305

在线出版日期：2006-12-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：917-921