双功能枯草杆菌诱导型高效表达分泌载体的构建与鉴定

摘要：

利用大肠杆菌质粒pSP72和枯草杆菌质粒pUB18共整合得到双功能克隆载体pSB.在pSB多克隆位点依次引入枯草杆菌果聚糖蔗糖酶基因启动子-信号肽序列sacB p.s.、地衣芽孢杆菌淀粉酶基因终止子序列α-amy T和短小芽孢杆菌增强子基因degQ,最终构建了双功能枯草杆菌诱导型高效表达分泌载体pSBPTQ.将Vasostatin Ⅰ基因作为靶基因检测sacB p.s.、α-amy T和degQ在pSBPTQ进行外源基因表达时的功能,结果表明,在蔗糖诱导下,sacB启动子有效启动了Vasostatin Ⅰ基因的表达和分泌,α-amy T提高了Vasostatin Ⅰ基因的转录效率,而degQ明显增强了Vasostatin Ⅰ基因的表达水平.Vasostatin Ⅰ基因在蔗糖诱导下成功表达并分泌到枯草杆菌细胞外,蛋白质分泌效率达到90%左右.质粒稳定性试验结果表明,经过40个世代之后,质粒pSBPTQ在枯草杆菌DB1342中仍旧保持在83%以上.

关键词：枯草杆菌、双功能载体、诱导型、表达分泌、构建

所属期刊栏目：46

分类号：Q93(微生物学)

资助基金：广东省自然科学基金011207

在线出版日期：2006-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：714-719