10.3321/j.issn:0001-6209.2006.04.031
利用温控载体构建碱性果胶酯裂解酶工程菌
从筛选出的Bacillus subtilis WSHB04-02菌株中扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL,将其插入载体pET22b(+)多克隆位点,得到带有前导序列PelB重组质粒pET22b(+)PL.以pET22b(+)PL为模板扩增出带前导序列的碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL,将其插入温控载体pHsh,重组载体在大肠杆菌JM109中得到表达.其表达量与以T7为启动子的重组菌BL21DE3[(pET22b(+)PL]相比,表达量相近.SDS-PAGE分析显示表达产物的分子量均为43kDa,同核酸序列测定所推导的值相符.研究表明利用pHsh构建的JM109(pHsh PL)诱导表达好,诱导方式简单廉价,这对该酶的大规模发酵具有重要意义.
碱性果胶酯裂解酶、pHsh、基因、表达
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X172(环境生物学)
国家科技攻关项目2003AA322050
2006-08-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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