表达绿色荧光蛋白重组新城疫病毒LaSota疫苗株的构建

摘要：

新城疫病毒是理想的新型活病毒疫苗载体,具有巨大的优势和应用前景.采用生产实践中广泛应用、免疫效果良好的NDV LaSota弱毒疫苗株,建立了反向遗传操作系统.在此基础上,进一步构建了表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组NDV基因组cDNA克隆,成功救获了重组病毒rLaSota-EGFP,病毒F1代尿囊病毒液按1×104EID50接种9～10日龄SPF鸡胚尿囊腔,接种后分别于24h、48h、72h及96h收获尿囊液,检测平均HA滴度分别为28、210.3、211.3和211,每mL尿囊液病毒量EID50分别为108.64、109.22、109.21和109.64,重组病毒与亲本株生长滴度在相近时间达到峰值,生长动力学特性与亲本株无明显差异.各代次重组病毒按1×106EID50病毒量接种9～10日龄SPF鸡胚,96h内完全不致死鸡胚.救获重组病毒保持了LaSota弱毒疫苗亲本毒株对鸡胚良好的高滴度生长适应和低致病特性,并且鸡胚连续传9代次仍保持GFP的稳定表达及生物学特性不变.重组病毒rLaSota-EGFP的成功救获为开展新城疫病毒活载体疫苗研制提供了可行的技术平台.

关键词：新城疫、绿色荧光蛋白、反向遗传操作、活载体疫苗

所属期刊栏目：46

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家规划项目2004BA519A19;2005BA711A10;国家重点基础研究发展计划973计划2005CB523200

在线出版日期：2006-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：547-551,后插1