神经氨酸酶茎部氨基酸缺失对H5N1亚型禽流感病毒生物学特性的影响

摘要：

近年来H5N1亚型禽流感病毒(AIV)神经氨酸酶(NA)茎部15～20个氨基酸的自发缺失时有报道,突变对于AIV生物学特性的影响还没有得到系统研究.应用反向遗传操作技术,拯救获得5株具有不同NA茎部长度的H5N1/PR8重组AIV.重组病毒的内部基因和血凝素(HA)基因来源相同,NA基因来源不同,并在NA茎部进行20个氨基酸的删除或添加突变.通过研究其生物学特性发现,5株重组病毒在SPF鸡胚中繁殖良好,其EID50、MDT和平均病毒滴度相似;NA茎部长短影响病毒的解凝能力,长茎病毒红细胞解脱能力比短茎病毒强;NA茎部15或20个氨基酸删除突变提高了重组病毒在MDCK细胞上的繁殖能力,短茎病毒释放出的病毒粒子数量是长茎病毒的10～100倍,释放时间提前6～10h,短茎病毒在MDCK细胞上形成的空斑也明显比长茎病毒的空斑大.实验结果揭示了AIV NA茎部氨基酸缺失突变的生物学意义,NA茎部15或20个氨基酸删除突变增强了AIV的细胞适应性,可能与现阶段H5N1亚型AIV宿主范围进一步扩大有关.利用反向.遗传技术成功拯救了5株H5N1/PR8重组流感病毒,为流感病毒基因功能研究和重组疫苗研究建立了技术平台.通过对AIV NA茎部氨基酸的删除突变提高了病毒在MDCK细胞上的繁殖产量,为流感病毒细胞苗的生产提供了新的思路.

关键词：H5N1亚型禽流感病毒、神经氨酸酶茎部、氨基酸删除突变、反向遗传操作技术

所属期刊栏目：46

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：江苏省应用基础研究计划项目05KJA23016

在线出版日期：2006-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：542-546