H5N1亚型禽流感病毒拯救体系的建立

摘要：

选择鸡胚高产的鸭源H5N1亚型禽流感病毒A/Duck/Shandong/093/2004株作为骨架病毒,在完成了全基因组序列测定基础上,设计合成的11对引物对病毒的8个基因分11段进行扩增.通过与转录载体PHW2000连接,构建A/SD/04的8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒:241、242、243、244、245、246、247和248.A/SD/04的8质粒与PR8(H1N1)进行不同组合的拯救,获得8个均含A/SD/04 HA基因的H5重组流感病毒.鸡胚尿囊液中重组病毒的血凝效价在28～210,EID50在10-8.5～10-9之间,MDT在34～46h之间,均与野生A/SD/04(wt A/SD/04)相似.重组病毒对6周龄的SPF鸡的静脉接种指数(IVPI)与wt A/SD/04却有明显的差异,说明不同组合的内部基因影响病毒对鸡的致病力,但不影响病毒的鸡胚致死能力、对鸡胚的感染能力和病毒在鸡胚中的繁殖能力.构建的A/SD/04的8个质粒拯救系统,为H5N1的基因功能研究和新型疫苗开发奠定基础.

关键词：H5N1亚型禽流感病毒、8质粒拯救系统、病毒拯救、重组病毒

所属期刊栏目：46

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：科技部专项基金2004BA519A19;江苏省应用基础研究计划项目05KJA23016

在线出版日期：2006-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：55-59