疏绵状嗜热丝孢菌热稳定几丁质酶的纯化及其性质研究

摘要：

采用硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子层析、Phenyl-Sepharose疏水层析等步骤获得了凝胶电泳均一的疏绵状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)几丁质酶.经SDS-PAGE和凝胶过滤层析测得纯酶蛋白的分子量在48～49.8kD之间.该酶反应的最适温度和最适pH分别为55℃和4.5,在pH4.5条件下,该酶在50℃以下稳定;65℃的半衰期为25min;70℃保温20min后,仍保留24%的酶活性.其N-端氨基酸序列为AQGYLSVQYFVNWAI.金属离子对几丁质酶的活性影响较大, Ca2+、Na+、K+、Ba2+对酶有激活作用;Ag+、Fe2+、Cu2+、Hg2+对酶有显著的抑制作用;以胶体几丁质为底物的Km和Vmax值分别为9.56mg/mL和22.12μmol/min.抗菌活性显示,该酶对供试病原菌有不同程度的抑制作用.

关键词：嗜热真菌、Thermomyces lanuginosus、几丁质酶、纯化、性质

所属期刊栏目：45

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金30270013,30170013;国家高技术研究发展计划863计划2003AA241162

在线出版日期：2005-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：270-274