抗A型肉毒毒素人源三结构域抗体的重组设计与表达

摘要：

以获得的抗A型肉毒毒素人源单链抗体ScFv B17为模板,PCR扩增抗体ScFv基因的重链可变区(VH)和轻链可变区(Vκ),以重链恒定区1(CH1)5'端12个氨基酸的序列作为连接肽,构建成三结构域抗体分子:VH-连接肽-Vκ(VH/Vκ).重组VH/Vκ抗体分子在大肠杆菌中得到高效表达,其表达量占菌体总蛋白质的34%以上.表达的蛋白质在菌内形成包含体,采用镍柱金属鏊合层析法对该包含体进行纯化,得到了纯度高达95%的VH/Vκ.ELISA等实验结果显示,重组设计并制备的三结构域抗体蛋白VH/Vκ不但可以特异识别毒素抗原,具有与原母本单链抗体ScFv相同的抗原特异性,而且具有了更高的相对亲和力和稳定性.

关键词：A型肉毒毒素、三结构域抗体、表达、中和活性

所属期刊栏目：45

分类号：Q786;R392.11(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2002CB513205

在线出版日期：2005-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：223-225