N端融合外源蛋白的兔出血症病毒衣壳蛋白自聚能力的研究

摘要：

将兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因插入杆状病毒转移载体pBLUEBACHIS2-B的6*HIS表达标签下游,与线性化野生型杆状病毒基因组DNA共转染Sf9昆虫细胞,经蚀斑纯化后获克隆化重组杆状病毒pBLUEBACHIS2B-VP60.以重组杆状病毒感染Sf9细胞,经SDS-PAGE和Western blot检测显示高效表达一分子量为69kD的重组蛋白,并且该蛋白可被兔抗RHDV高免血清识别.血凝试验表明,该重组蛋白可以凝集人"O"型红细胞,血凝价达216,同时,该血凝性可被抗RHDV的高免血清所抑制.经电镜观察,重组病毒表达的融合有6*HIS表达标签的衣壳蛋白仍可在昆虫细胞内自聚成不包裹核酸的、与天然RHDV病毒粒子在物理形态上相似的病毒样颗粒(VLPs),并且该VLPs与兔抗RHDV高免血清作用后于电镜下可见凝集成团的现象,表明其与天然RHDV病毒粒子在抗原性上也极为相似.

关键词：兔出血症病毒、衣壳蛋白VP60基因、重组杆状病毒、表达、病毒样颗粒

所属期刊栏目：45

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30400320

在线出版日期：2005-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：62-65