鸡传染性喉气管炎病毒gB基因的克隆及其在耻垢分枝杆菌中的表达

摘要：

以ILTV基因组为模板,利用PCR特异扩增出gB基因,定向克隆到中间质粒载体pY-α,构建了中间质粒pY-α-gB.然后以中间质粒pY-α-gB为模板,扩增出含有人结核分枝杆菌启动子hsp70基因和堪萨斯分枝杆菌α信号肽基因的hsp-α-gB片段,回收补平后与穿梭表达载体pRR3平端连接,从而构建大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pR-α-gB.再将其电转化至耻垢分枝杆菌M.smegmatis mc2 155,ELISA检测表明重组菌株M.smegmatis mc2 155 (pR-α-gB)的表达产物具有很好的反应原性.Western blot检测说明gB基因在分枝杆菌中获得了表达并具有良好的免疫原性.鸡胚中和试验结果表明该重组菌株可以中和1个剂量EID50的ILTV强毒,能够保护SPF鸡胚抵抗强毒攻击.

关键词：聚合酶链式反应、克隆、表达、穿梭表达载体

所属期刊栏目：44

分类号：Q939(微生物学)

资助基金：河北省自然科学基金2004000154

在线出版日期：2004-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：830-833