人小肠三叶因子在糙皮侧耳中的整合、表达及检测

摘要：

用原生质体法将含双35S-AMV启动子及人小肠三叶因子(hITF)cDNA的表达载体导入糙皮侧耳(Pleurotusostreatus)中,原生质体转化子在含有除草剂的培养基上初步筛选,获得抗性菌株.通过PCR分析证明hITF cDNA已整合到侧耳基因组中.以hITF为抗原免疫家兔制备了抗血清,纯化后的IgG以直接型酶联免疫吸附检测(ELISA)方法测定效价,并建立起hITF的竞争型酶联免疫吸附检测(ELISA)方法,给出了标准工作曲线,以应用于大规模表达菌株的筛选确立.检测表明,hITF在侧耳新鲜菌丝体中分3个表达量段:1000～1250ng/g、1480～1700ng/g、最高达2000～2250ng/g,约占总可溶性蛋白的0.7%～1.5%.Western印迹进一步分析证明hITF在侧耳中的表达.

关键词：人小肠三叶因子(hITF)、糙皮侧耳、竞争型ELISA

所属期刊栏目：44

分类号：Q943(植物学)

在线出版日期：2004-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：609-612