10.3321/j.issn:0001-6209.2004.05.006
原位PCR和原位杂交检测蛋鸡J亚群禽白血病病毒
根据ALV-J原型株HPRS103株pg85基因的内部序列,和pol基因的3'端设计一对引物H5/H7.从发生ML病死蛋用型鸡的肿瘤、骨髓、肝脏、脾脏和输卵管组织中提取总RNA,反转录为cDNA,经PCR扩增得到长度为545bp的ALV-J cDNA特异性探针.探针定位于5258~5802bp.将病鸡的组织石蜡切片置Hybaid Express原位PCR仪平台上,以H5/H7为引物进行原位PCR扩增.应用地高辛标记的cDNA探针对原位PCR扩增后切片进行了原位杂交检测.结果在待检组织肿瘤组织、十二指肠、骨髓中出现明显的阳性信号.睾丸、肺、胰腺、大脑、输卵管、肾脏均检出散在的阳性信号.这是国内外首次从分子水平证明蛋鸡J亚群禽白血病.
原位PCR、原位杂交、蛋鸡J亚群禽白血病病毒、cDNA探针
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Q78(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金30371073
2004-10-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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584-587