原核表达hbFGF结构与功能优化的研究

摘要：

野生型hbFGF蛋白可溶性与稳定性较低一直是困扰研发人员的难题.分析其氨基酸序列发现含有4个游离巯基,其中第78、96、101位半胱氨酸游离巯基可能直接影响其可溶性、稳定性及活性. 对天然hbFGF进行定点突变,一组将Cys78、Cys96同时突变,另一组将Cys78、Cys96与Cys101进行联合突变,均改为丝氨酸密码子,然后克隆入原核表达载体pET-3c,进行表达, 结果发现两种突变蛋白的可溶性大幅度增加,稳定性明显上升,其中三点突变的效果更为显著,但蛋白质的活性明显下降.可以认为78、96与101位半胱氨酸的游离巯基同时参与了天然hbFGF多聚体的形成,是导致野生型hbFGF可溶性与稳定性较低的主要原因,Cys101还与维持hbFGF的活性直接有关.

关键词：人碱性成纤维细胞生长因子、二硫键、定点突变、包涵体

所属期刊栏目：44

分类号：Q939(微生物学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划Z18-03-29

在线出版日期：2004-09-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：504-506