致病钩体表层膜蛋白新基因(Lslp)的克隆表达及免疫原性研究

摘要：

克隆表达钩端螺旋体表层膜蛋白新基因Lslp并分析表达产物的免疫原性.根据前期研究得到的致病钩体新基因Lslp(GenBank AF325807)的序列设计引物,在6株致病钩体中扩增Lslp基因并测序.以BamHⅠ酶切Lslp和pGEX 1-λT,构建重组质粒并用酶切和PCR鉴定,进一步在大肠杆菌中诱导表达,并进行免疫印迹分析;纯化表达产物免疫家兔,ELISA检测血清抗体滴度.结果显示Lslp在6株致病钩体中均能扩增出相应片段,且序列同源性达到99.6%;构建高效原核表达重组质粒pGST-LslP,经IPTG诱导在大肠杆菌中可表达出66kD GST融合蛋白,并能与全钩抗血清发生免疫印迹反应;将上述融合蛋白免疫新西兰大白兔产生1:5120 高滴度的IgG抗体.研究结果提示致病钩体膜蛋白新基因Lslp可在大肠杆菌进行高效表达,表达产物能被全钩抗血清识别,为研究钩体的致病机制和筛选保护性抗原提供了基础.

关键词：钩端螺旋体、表层膜蛋白基因Lslp、克隆表达、免疫原性

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分类号：R379.5(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30070670;重庆市应用基础研究基金2002-7481

在线出版日期：2004-09-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：500-503