来源于橄榄绿链霉菌A1的高比活木聚糖酶XYNB的高效表达及性质的比较分析

摘要：

高效表达高比活木聚糖酶是进一步提高木聚糖酶发酵效价、降低其生产成本的有效途径.将橄榄绿链霉菌(Streptomyces olivaceoviridis) A1的高比活木聚糖酶成熟蛋白编码基因xynB克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9中,转化毕赤酵母得到重组酵母,在重组酵母中木聚糖酶基因得到了高效分泌表达,且表达产物具有生物学活性.在3L发酵罐中蛋白表达量约1.4mg/mL, 酶活性(效价)为1200IU/mL.SDS-PAGE分析表明,表达的木聚糖酶XYNBa为糖基化蛋白, 分子量为31kD, 经脱糖基化处理得到21kD 的XYNBb, 与橄榄绿链霉菌A1所产原酶XYNB大小一致.通过对XYNB、XYNBa及XYNBb酶学性质的比较发现:三者在比活性、Vmax及热稳定性方面有较大差异.该酶对不同木聚糖的酶解产物的糖份分析表明:酶解产物的主要成分为木二糖、木三糖和木四糖,占总糖含量的95%以上.

关键词：高比活木聚糖酶、高效表达、毕赤酵母、酶学性质

所属期刊栏目：44

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA214041

在线出版日期：2004-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：340-344