烟草花叶病毒运动蛋白cDNA的克隆及融合蛋白的表达

摘要：

从烟草花叶病毒(TMV)中提取总RNA,通过反转录-PCR (RT-PCR) 扩增得到其运动蛋白(MP)的基因,将扩增产物克隆到pMD-18T载体上.DNA序列分析表明,所得到的运动蛋白的基因全长为807bp (GenBank接受号AY300161), 与已发表TMV序列(GenBank登陆号为NC-001367)和同属的番茄花叶病毒(ToMV, GenBank登陆号为NC-002692相比核苷酸的同源性分别为98.0%和80.9%,氨基酸的同源性分别为99.1%和80.0%.将目的片段亚克隆到表达载体pET-30a上,并在大肠杆菌JM109中诱导表达,诱导9h 后,融合蛋白表达量最大.诱导后的工程菌超声后经SDS-PAGE检测,融合蛋白以可溶形式存在.

关键词：烟草花叶病毒、运动蛋白、cDNA、融合蛋白表达

所属期刊栏目：44

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划G2000016205;江苏省博士后科学基金

在线出版日期：2004-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：182-184