猪胸膜肺炎放线杆菌毒素ⅢA基因的克隆、序列分析及原核表达

摘要：

因胸膜肺炎放线杆菌的致病性主要是由毒素决定的,故参照猪胸膜肺炎放线杆血清2型菌株的序列(GenBank L12145)设计了一对特异性引物,用PCR的方法扩增apxⅢA基因并得到了长3 466bp的片段,然后将其克隆到pMD-18T中,经酶切鉴定和序列分析表明克隆是成功的;再将apxⅢA插入到原核表达载体pET-28b后,转化BL21(DE3),在IPTG诱导下获得高效表达,经Western blotting检测证实表达产物有活性.以表达产物包被ELISA板,建立了特异、敏感的ELISA诊断方法.

关键词：胸膜肺炎放线杆菌、毒素ⅢA(apxⅢA)、克隆、原核表达

所属期刊栏目：43

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30200011;湖北省科技攻关项目2001AA201B02

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：324-329