10.3321/j.issn:0001-6209.2002.05.012
圈卷产色链霉菌硝基烷类氧化酶的分离纯化及酶学性质
圈卷产色链霉菌硝基烷类氧化酶基因naoA在大肠杆菌中获得了成功表达,从含有重组质粒pNA101(pET23b∷naoA)的工程菌株BL21(DE3)中分离纯化了硝基烷类氧化酶,SDS-PAGE检测为均一.对纯酶进行了酶学性质及动力学研究.底物为1-硝基丙烷、2-硝基丙烷和硝基乙烷时,在0.4mol/L的磷酸缓冲液中,酶的最适反应pH值为7~8,最适反应温度为48℃~56℃.室温保存6d后,酶的活性保持了43.3%,但对60℃以上的高温敏感.硫醇化合物如巯基乙醇、还原型谷胱甘肽不同程度地抑制酶活性,特别是NADH,其浓度为1mmol/L时,酶活性几乎全部丧失.以1-硝基丙烷为底物时,NaoA的Km为35.7mmol/L,Vmax为0.199μmol/(μg.min).
圈卷产色链霉菌、硝基烷类氧化酶、纯化、酶学性质
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Q344(遗传学分支学科)
国家自然科学基金39830010
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
587-593