平颏海蛇PLA2在大肠杆菌中的融合表达

摘要：

将编码平颏海蛇磷脂酶A2的基因(PLA2-9)分别克隆于硫氧环蛋白基因融合表达载体pThioHisC和pTRX的HP-trxA和trxA基因的3′末端,构建符合读码框的融合表达载体pThioHisC-PLA2和pTRX-PLA2.25℃下经IPTG诱导,PLA2融合蛋白在两种原核系统中均能获得较高表达,但PLA2在pTRX系统下的表达量和蛋白溶解性优于pThioHisC系统.将两种系统下的表达产物进行金属螯合亲和层析纯化,Trx-PLA2融合蛋白的纯度可达85%以上,而HP-Trx-PLA2不表现出对介质的亲和性,难以得到纯化.由此,将pTRX-PLA2载体系统确立为进一步大量表达和纯化的载体系统.

关键词：平颏海蛇磷脂酶A2、融合表达、亲和层析

所属期刊栏目：42

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA626010;国家自然科学基金69935020

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：400-405