应用多重PCR方法检测石蜡包埋组织标本中的分枝杆菌DNA

摘要：

应用多重PCR方法检测并鉴别石蜡包埋组织中的结核分枝杆菌复合体与非结核分枝杆菌DNA扩增片段类型,为结核分枝杆菌复合体感染与非结核分枝杆菌感染的病理学诊断提供一种补充的鉴别诊断方法.应用三对具有特异性的寡核苷酸引物,进行多重PCR扩增.这三对引物分别对应于分枝杆菌65kD表面抗原、结核分枝杆菌插入序列IS6110及人类β-珠蛋白基因的部分序列,其扩增产物分别为383bp、123bp和268bp.此种多重PCR方法检测的灵敏度为0 6pg.经多重PCR扩增后进行凝胶电泳,结核分枝杆菌复合体(结核分枝杆菌、牛型结核分枝杆菌、BCG)均可见383bp、123bp片段,而非结核分枝杆菌(鸟、龟、瘰疬、蟾蜍、堪萨斯、胞内、耻垢分枝杆菌)仅见383bp片段(猿猴分枝杆菌与结核分枝杆菌复合体相同).与上述相比,分枝杆菌感染的临床标本分别增加了一条268bp片段.对209例临床初步诊断为淋巴结结核病人的石蜡包埋组织标本进行了多重PCR检测,193例病理诊断为淋巴结结核、结核性肉芽组织、结核性肉芽肿性炎症病人的标本,检测结果符合结核分枝杆菌复合体感染.16例病理诊断为可疑淋巴结结核病人的标本,15例检测结果符合结核分枝杆菌复合体感染,1例符合非结核分枝杆菌感染.此种多重PCR方法可以同时检测并鉴别结核分枝杆菌复合体及非结核分枝杆菌DNA(猿猴分枝杆菌除外),具有高度的特异性和敏感性.

关键词：多重聚合酶链反应、结核分枝杆菌复合体、非结核分枝杆菌、石蜡包埋组织标本

所属期刊栏目：42

分类号：Q939.13(微生物学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：69-75