极端嗜热古菌--芝田硫化叶菌DNA解旋酶的分离纯化和性质研究

摘要：

采用Q Sepharose离子交换层析、磷酸纤维素P11吸附层析、肝素琼脂糖吸附层析、Superdex 200凝胶过滤和Phenyl Superose疏水层析等步骤,从嗜酸热芝田硫化叶菌细胞裂解液中分离纯化了一个DNA解旋酶.该解旋酶具有受DNA激活的ATP酶活性.根据SDS-PAGE测定结果,该酶的分子质量约为63kD.芝田硫化叶菌DNA解旋酶可以解开底物上70bp的双链区,其解旋活性依赖于双链区旁的单链分叉.该解旋酶的活性依赖于Mg2+和ATP的水解,在NaCl浓度超过200mmol/L时受到抑制.该酶的最适pH为6.7.该酶在40℃～80℃之间均有活性,70℃时活性最高.芝田硫化叶菌DNA解旋酶是从古菌中分离得到的第一个天然DNA解旋酶.

关键词：极端嗜热古菌、芝田硫化叶菌、DNA解旋酶

所属期刊栏目：41

分类号：Q55(酶)

资助基金：国家自然科学基金39970009,39925001

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：340-347