人谷胱甘肽硫转移酶A1在乳酸乳球菌中的表达及活性研究

摘要：

用RT-PCR技术从人肝总RNA中分离扩增了人谷胱甘肽硫转移酶A1基因的cDNA序列,克隆至大肠杆菌表达质粒pET23b,采用蛋白表达筛查法及DNA测序证明该cDNA序列完全正确.重组质粒pET23bhgst转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导获得高效表达的可溶性hGSTA1产物,其表达量约为大肠杆菌可溶性总蛋白的40%.将hGSTA1cDNA亚克隆至乳酸乳球菌表达载体pMG36e,电穿孔法转化乳酸乳球菌MG1363获得hGSTA1乳酸乳球菌表达株.SDS-PAGE及Western杂交分析表明该菌株表达预期大小的hGSTA1融合蛋白,经谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析纯化获得的hGSTA1蛋白具有较高的谷胱甘肽硫转移酶活性.具hGSTA1酶活性的乳酸乳球菌工程菌可望应用于研制防癌保健乳制品.

关键词：谷胱甘肽硫转移酶、基因克隆表达、乳酸乳球菌

所属期刊栏目：40

分类号：Q555(酶)

资助基金：中国科学院资助项目39800080;国家重点实验室基金

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：132-138