Fer-1和DFO对Erastin诱导人神经母细胞瘤细胞损伤的保护作用
目的 研究Erastin对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)的损伤作用及Ferrostatin-1(Fer-1)和Deferoxamine(DFO)对细胞损伤的保护效果,为Fer-1和DFO应用于神经退行性疾病提供依据.方法 将SH-SY5Y细胞分为溶剂对照组(DMSO)、Erastin 组(10 μmol/L)、Fer-1 组(10 μmol/L)、DFO 组(100 μmol/L)、Erastin+Fer-1 组(10 μmol/L Erastin+10 μmol/L Fer-1)和 Erastin+DFO 组(10 μmol/L Erastin+100 μmol/L DFO),染毒 24 h.CCK-8 法检测细胞活力;显微镜观察细胞形态结构;透射电子显微镜观察细胞线粒体结构变化;流式细胞仪检测细胞脂质ROS水平;试剂盒检测细胞丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、细胞铁含量;Western blot法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、人胱氨酸/谷氨酸转运蛋白(SLC7a1 1)和突触素(SYN)蛋白表达.结果 Erastin暴露可导致细胞存活率降低至73.19％±3.51％,明显低于对照组100％±0.00％(P＜0.01);细胞形态不规则,突触减少,SYN蛋白表达明显降低(P＜0.01);细胞线粒体明显皱缩,膜增厚,线粒体嵴减少.与对照组相比,Erastin暴露组细胞GSH含量、GSH-Px的活力、SOD的活力明显降低(P＜0.01),脂质ROS含量、MDA含量、细胞内铁离子水平明显升高(P＜0.01),GPX4、SLC7a11蛋白表达水平明显降低(P＜0.01).与Erastin暴露组相比,Erastin+Fer-1组、Erastin+DFO组细胞的存活率明显提高(P＜0.01),不规则形态和突触缺失的细胞数目减少,SYN蛋白表达水平明显增加(P＜0.01);异常形态线粒体数量减少,线粒体形态结构趋于正常,脂质活性氧(ROS)、MDA和细胞铁离子水平明显下降(P＜0.01),GSH含量、GSH-Px和SOD活力明显提升(P＜0.01),GPX4、SLC7a11蛋白表达水平明显增加(P＜0.01).结论 Erastin可以诱导SH-SY5Y细胞损伤及铁死亡;Fer-1和DFO通过抑制细胞铁死亡而起到细胞保护作用.
Erastin、人神经母细胞瘤细胞、铁死亡、突触、保护作用
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R99;R114(毒物学（毒理学）)
国家自然科学基金;山西省重点研发计划;山西省工程提质增效项目
2023-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
1-5,11
