siRNA沉默STAT3基因对TGF-β1诱导小鼠胰腺星状细胞活化的影响
目的 通过siRNA沉默小鼠胰腺星状细胞中STAT3基因,探讨STAT3信号转导通路在慢性胰腺炎胰腺纤维化中的作用.方法 根据GeneBank中STAT3全长cDNA序列,选取特异性序列为干扰作用的靶点,构建STAT3siRNA表达载体,脂质体介导转染PSC,ELISA法检测PSC产生的趋化因子,MTT法检测胰腺星状细胞增殖,细胞爬片免疫组化染色检测α-SMA阳性细胞,Western blot和RT-PCR检测胰腺星状细胞STAT3蛋白及mRNA表达水平,在确定胰腺星状细胞内STAT3基因成功沉默的基础上,给予TGF-β1刺激PSC.结果 和对照组相比,ELISA法,MTT法和细胞爬片免疫组化显示各时间点,诱导组、空载组和转染组A值,α-SMA,IL-6和MCP-1表达量均有所升高(P＜0.01),转染组A值,α-SMA,IL-6和MCP-1表达量明显低于诱导组和空载组(P＜0.01),诱导组和空载组A值,α-SMA、IL-6和MCP-1表达比较差异无统计学意义(P＞0.05).PCR和Western blot结果显示,和对照组相比,诱导组、空载组和转染组α-SMA和Smad2表达明显升高(P＜0.01),p-Smad2和PPAR-γ的表达明显降低(P＜0.01),转染组α-SMA和Smad2的表达明显低于导组和空载组(P＜0.01),p-Smad2和PPAR-γ表达明显高于诱导组和空载组(P＜0.01).转染组STAT3和p-STAT3表达明显低于对照组、诱导组和空载组(P＜0.01).结论 siRNA通过调控STAT3信号通路介导下游靶基因的表达,参与抑制胰腺星状细胞活化、进而对抗胰腺纤维化.这一结果为慢性胰腺炎的治疗提供了新的治疗靶点.
慢性胰腺炎、siRNA、胰腺星状细胞(pancreatic stellate cell、PSC)、STAT3信号通路、细胞活力
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Q487(消化生理学)
陕西省教育厅科学研究项目11JK0717
2020-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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