亚硝酸钠与亚硫酸钠联合毒性对人胚肾细胞HEK-293Apaf-1信号通路的影响
目的 探讨亚硝酸钠与亚硫酸钠联合毒性对人胚肾细胞HEK-293 Apaf-1信号通路的影响.方法 取处于对数生长期的HEK-293细胞,用亚硝酸钠、亚硫酸钠染毒.采取3×3析因设计:对照组(0.0 mmol/L Na2NO2+0.0 mmol/L Na2SO3)、低亚硝酸钠组(低N,3.0 mmol/L Na2NO2)、高亚硝酸钠组(高N,12.0 mmol/L Na2NO2)、低亚硫酸钠组(低S,4.0 mmol/L Na2SO3)、高亚硫酸钠组(高S,16.0 mmol/L Na2SO3)、低N低S组(3.0 mmol/L Na2NO2+4.0 mmol/L Na2SO3)、低N高S组(3.0 mmol/L Na2NO2+16.0 mmol/L Na2SO3)、高N低S组(12.0 mmol/L Na2NO2+4.0 mmol/L Na2SO3)、高N高S组(12.0 mmol/L Na2NO2+16.0 mmol/L Na2SO3),培养24 h,MTT法检测细胞活力,酶联免疫吸附法测定培养液中Apaf-1、Caspase9和Bax水平.结果 低N组存活率略高于对照组(P>0.05),Bax、Apaf-1和Caspase9蛋白表达水平略低于对照组(P>0.05);高N组HEK-293存活率低于对照组及低N组(P<0.01),Bax、Apaf-1和Caspase9蛋白表达水平高于对照组及低N组(P<0.01);低S组HEK-293存活率低于对照组(P<0.01),Bax、Apaf-和Caspase9蛋白表达水平高于对照组(P<0.01);高S组HEK-293存活率低于对照组及低S组(P<0.01),Bax、Apaf-1和Caspase9蛋白表达水平高于对照组及低S组(P<0.01);低N高S组HEK-293存活率低于低N低S组(P<0.01),Bax、Apaf-1和Caspase9蛋白表达水平高于低N低S组(P<0.01);高N高S组HEK-293存活率低于高N低S组(P<0.叭),Bax、Apaf-1和Caspase9蛋白表达水平高于高N低S组(P<0.01);高N低S组HEK-293存活率低于低N低S组(P<0.01),Bax、Apaf-1和Caspase9蛋白表达水平高于低N低S组(P<0.01);高N高S组HEK-293存活率低于低N高S组(P<0.01),Bax、Apaf-1和Caspase9蛋白表达水平高于低N高S组(P<0.01);在低N低S组剂量组,Apaf-1低于两者单独作用时的水平之和(P<0.01).Apaf-1与Bax,Apaf-1与Caspase9正相关关系明显(P<0.01);Na2NO2与Na2SO3单独作用时均可影响Bax、Apaf-1和Caspase9水平的变化(P<0.05或P<0.01);Na2NO2与Na2SO3对Apaf-1的交互作用明显(P<0.01),对Bax和Caspase9交互作用不明显(P>0.05).结论 Apaf-1通路可能参与了NaNO2与Na2SO3致人胚肾细胞HEK-293的凋亡过程;Na2NO2与Na2SO3对Apaf-1存在交互作用,在N低S组表现为拮抗作用.
亚硝酸钠、亚硫酸钠、联合毒性、HEK-293、Apaf-1
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R114(卫生基础科学)
贵州省疾病预防控制中心青年技术基金2017-E1-3青
2019-12-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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