硫酸镍诱导体外大鼠睾丸间质细胞凋亡及其对c-kit和caspase-3基因表达的影响
目的 观察硫酸镍( NiSO4)诱导体外培养大鼠睾丸间质细胞凋亡及其c-kit和caspase-3 mRNA及蛋白表达的变化,探讨镍致睾丸间质细胞损伤的可能机制.方法 体外提取和纯化大鼠睾丸间质细胞,用0、250、500和1 000μmol/L NiSO4分别处理睾丸间质细胞,染毒时间分别为6、12和24 h.采用AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测睾丸间质细胞的凋亡发生率,实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测c-kit和caspase-3 mRNA及蛋白的表达水平.结果 (1) AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测结果显示,间质细胞凋亡主要发生于NiSO41000 μmol/L染毒12 h和NiSO4 250、500、l 000 μmol/L染毒24 h组.(2)实时荧光定量PCR结果显示:与对照组比较,染毒6 h NiSO4 250 μmol/L、染毒12hNiSO4 250和500 μmol/L c-kit mRNA相对表达量上调(P＜0.05)；染毒24 h NiSO4 500和l 000 μmol/L c-kit mRNA相对表达量下降(P＜0.05).NiSO4各浓度和各时间组caspase-3 mRNA相对表达量均上调(P＜0.05).(3)Western blotting结果显示:与对照组比较,NiSO4各浓度c-kit蛋白表达逐渐减弱,caspase-3蛋白表达逐渐上调,主要见于NiSO41 000 μmol/L染毒6h以及NiSO4各浓度分别染毒12和24 h.结论 NiSO4可诱导体外大鼠睾丸间质细胞凋亡,且与基因c-kit和caspase-3 mRNA及蛋白异常表达有关.
硫酸镍、睾丸间质细胞、C-kit、Caspase-3
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R994(毒物学（毒理学）)
2012-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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