苯乙基异硫氰酸盐对神经分化胚胎干细胞凋亡诱导及其机制的研究
目的 研究苯乙基异硫氰酸盐对体外神经分化胚胎干细胞(ES)凋亡的诱导及其作用机制.方法 应用MTT法检测苯乙基异硫氰酸盐对ES细胞活性的影响;体外未分化培养和悬滴、悬浮培养后由5×10-7mol/L视黄酸诱导神经定向分化培养的ES细胞,经不同浓度苯乙基异硫氰酸盐(0、2、4和8 ttmol/L)作用24 h,采用流式细胞仪、Ho-chest33258染色和Capase-3酶活性分析检验ES细胞的凋亡效应,并采用蛋白免疫印迹方法 检测细胞内Bcl-2及Bax基因的表达变化.结果 与阴性对照比较,未分化和神经分化培养的ES细胞在苯乙基异硫氰酸盐作用下均可出现凋亡形态变化、细胞凋亡率增加和胞内Capase-3酶活性上升,同时胞内Bcl-2基因的表达受到抑制,且呈一定剂量反应关系;另相同剂量条件下,苯乙基异硫氰酸盐对神经分化ES细胞凋亡的诱导作用远较未分化ES细胞显著.结论 苯乙基异硫氰酸盐具有诱导神经分化ES细胞发生凋亡的作用,Capase-3活性增加和Bcl-2表达抑制可能是其作用的主要机制.
胚胎干细胞、苯乙基异硫氰酸盐、细胞凋亡
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R994.6(毒物学(毒理学))
”十一五”国家科技支撑计划重大项目2006BAK02A07;农业部科技行业科技项目200903054-06;中国疾病预防控制中心青年科研基金2010A206
2011-05-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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