microRNA-130b促进三阴性乳腺癌细胞及其作用机制

摘要：

目的：探讨microRNA-130b（miR-130b）的表达差异对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer, TNBC) MDA-MB-231细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及机制。方法：通过LipofectamineTM 2000将miR-130b抑制剂或模拟物及阴性对照转染到MDA-MB-231细胞中。应用实时定量聚合酶链反应(quantitative real time-polymerase chain re-action，qRT-PCR)检测miR-130b表达和转染效率。应用MTT实验、克隆形成实验、划痕实验以及transwell实验，检测miR-130b模拟物或抑制剂对MDA-MB-231细胞功能影响。应用生物信息学网站寻找miR-130b可能的靶基因。应用双荧光素酶载体实验验证预测的靶基因，并通过qRT-PCR以及Western印迹实验进一步证实。结果：MDA-MB-231细胞转染miR-130b抑制剂或模拟物。与阴性对照组相比，模拟物组miR-130b的表达显著升高，抑制剂组miR-130b的表达显著下降，差异有统计学意义（P<0.01）。与阴性对照组相比，模拟物组细胞增殖（P<0.05）、克隆形成（P<0.05）、侵袭（P<0.01）及迁移（划痕试验P<0.05，transwell试验P<0.05）能力明显增高。相反，抑制剂组细胞增殖（P<0.05）、克隆形成（P<0.05）、侵袭及迁移（划痕试验P<0.05，transwell试验P<0.01）能力较阴性对照组明显受抑制。生物信息学技术预测 CYLD 为 miR-130b 的潜在靶基因。双荧光素酶载体实验结果显示转染 miR-130b 模拟物＋psciCHECK2-CYLD 3′UTR（野生型）后荧光素酶活性较转染阴性对照＋psciCHECK2-CYLD 3′UTR（野生型）降低57.21%（P<0.001）。此外，与阴性对照组相比，CYLD基因mRNA水平在抑制剂组或模拟物组均无明显改变(P>0.05）；但CYLD蛋白表达在抑制剂组明显上调，模拟物组的表达明显下降（P<0.001）。结论：miR-130b可促进TNBC MDA-MB-231细胞的增殖、侵袭及迁移，其作用至少部分通过抑制CYLD基因实现。

关键词：miR-130b、CYLD、三阴性乳腺癌、增殖、侵袭

所属期刊栏目：22

分类号：R737.9(肿瘤学)

在线出版日期：2017-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：49-56