小鼠肝星状细胞的分离、培养及鉴定方法
目的:探索BALB/c小鼠肝星状细胞(HSCs)分离、纯化的可行方案,并评价依该法分离所得HSCs的生物学特性.方法:经肝门静脉先用不含钙镁离子的Hank液充分灌洗,再以浓度为1 mg/mL的Ⅳ型胶原酶灌注BALB/c小鼠肝脏.取肝后.完整分离后碾碎,37℃水浴振荡30 min,Percoll连续密度梯度(60%)离心法分离、纯化HSCs,苔盼蓝染色检测HSCs活性,结蛋白免疫细胞化学鉴定HSCs,光镜观察体外培养HSCs的形态学变化.结果:纯化后每只小鼠HSCs收获量约为(5.5±0.4)×105个,HSCs纯度>90%.HSCs细胞活率>90%.结论:本实验建立的的分离纯化方案可获得高纯度高活率的小鼠HSCs.
肝星状细胞、细胞分离、原代培养、小鼠
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R657.3(外科学各论)
2009-04-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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