基质金属蛋白酶-1shRNA真核表达载体的构建

摘要：

目的 构建基质金属蛋白酶-1(MMP-1)特异的RNA干扰质粒载体.方法 根据GenBank 数据库提供的MMP-1基因核苷酸序列,选择设计能转录短发夹状RNA (Short hairpin RNAs,shRNA) 的DNA 序列,并与pWH1质粒载体连接,用酶切的方法 进行鉴定;将构建成功的特异性表达载体(pWH1-MMP1)稳定转染至人腺样囊性癌ACC-M细胞系后,应用RT-PCR、免疫组织化学及Western Blot对细胞MMP1的表达进行检测.结果 在成功转染pWH1-ACC-M表达载体的ACC-M细胞中,MMP1 mRNA和蛋白的表达明显降低.结论 成功构建了MMP1特异性shRNA表达载体,可有效地沉默MMP1基因,为进一步研究MMP1表达与腺样囊性癌增殖和转移的相关性奠定了一定的实验基础.

关键词：涎腺、腺样囊性癌、短发夹状RNA、真核表达载体、基质金属蛋白酶1

所属期刊栏目：23

分类号：R313(医用一般科学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30371551

在线出版日期：2012-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：111-114