10.3969/j.issn.1004-3594.2006.11.002
蛋白激酶Cδ亚型cDNA的克隆及其序列分析
目的 研究中国仓鼠卵巢上皮细胞是否表达蛋白激酶Cδ亚型.方法 参照GeneBank数据库PKC δ亚型的cDNA序列;通过EMBL-EBI数据库的CLUSTALW,选取种属间同源性最高的序列;利用GENERUNNER软件设计PKC δ亚型的特异引物;RT-PCR扩增CHO细胞PKC δ亚型的cDNA序列;利用AT克隆技术将PKC δ连接到pGEM-T载体上,经蓝白斑筛选,酶切鉴定后测序;Western blotting方法检测CHO细胞中PKC δ亚型.结果 运用RT-PCR和Western blotting技术证实CHO细胞表达PKC δ亚型,并经测序证实.结论 CHO细胞中发现PKC δ亚型的存在,为深入研究PKC δ亚型的结构、功能及与细胞内信号转导通路的关系奠定基础.
蛋白激酶C、RT-PCR、Western blotting、克隆
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Q5(生物化学)
武警部队科研项目WKH2006-2
2006-12-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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