沙冬青子叶原生质体瞬时表达体系的建立及其AmDREB1蛋白的亚细胞定位

摘要：

以沙冬青 (Ammopiptanthus mongolicus (Maxim.ex Kom.) Cheng f.) 幼苗的子叶为材料, 对其原生质体的分离、纯化和瞬时表达体系进行了研究.结果表明, 子叶原生质体分离的最佳酶解液组成为CPW溶液+3.0％纤维素酶R-10+0.5％离析酶R-10+0.3％半纤维素酶+9.0％甘露醇 (p H5.8);最佳酶解条件为室温、避光、40 r/min轻摇14 h.采用W5溶液作为漂洗液将酶解物稀释后进行过滤, 将过滤液在4℃、700 r/min条件下离心5 min, 所得纯化原生质体的产量约为2.50×106cells/g, 活力达到90％;以纯化的原生质体作为受体, 利用聚乙二醇 (PEG) 介导法成功将植物瞬时表达载体p BI-GFP导入其中, 转化效率达到50.8％.利用本研究建立的原生质体瞬时表达体系, 检测到沙冬青脱水应答转录因子Am DREB1定位于细胞核内.

关键词：沙冬青、原生质体、瞬时表达、DREB转录因子、亚细胞定位

所属期刊栏目：36

分类号：Q943.2(植物学)

资助基金：国家自然科学基金项目 31260256, 31560299；内蒙古自然科学基金重大项目 2012ZD02. This work was supported by grants from the National Natural Science Foundation of China31260256，31560299;Major Project of Natural Science Fund of Inner Mongolia Autonomous Region 2012ZD02 ．

在线出版日期：2018-10-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：562-568