10.3969/j.issn.2095-0837.2007.06.002
番茄(Solanum lycopersicum)果胶酸裂解酶P56在大肠杆菌中的重组表达
果胶酸裂解酶P56在番茄花粉管伸长过程中起着重要的作用,为了制备番茄P56蛋白的抗体,进行番茄花粉管萌发过程中P56蛋白的免疫组织化学研究,对P56基因在大肠杆菌系统的重组表达进行了研究.先采用Overlap-PCR的方法,从番茄基因组DNA中克隆了成熟P56蛋白的cDNA序列(LAT56),再构建重组表达质粒pET28a(+)-LAT56,转化大肠杆菌BL21-CodenPlus(DE3)-RIL,得到了重组表达工程菌pET-28a(+)-LAT56-BL21-CodenPlus(DE3)-RIL.在0.5 mmol/L IPTG、15℃和180 r/min条件下,经过60 h的诱导培养,重组蛋白表达量为细胞总蛋白的30%左右,主要以包涵体形式存在,重组蛋白经Ni2+-nitrilotriacetate-agrose 亲和柱层析,得到了SDS-PAGE显示为单一蛋白带的纯化蛋白.
番茄、果胶酸裂解酶(P56)、大肠杆菌、表达
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Q942.6(植物学)
国家自然科学基金30170005;江苏省自然科学基金BK2005136;江苏省教育厅高校自然科学基金07KJD180237
2008-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
539-543
