利用GpC DNA甲基化酶M.CviPI高效表达限制性内切酶PstⅠ

摘要：

源自原核生物"限制-修饰"系统的限制性内切酶是生命科学研究的重要工具酶.将小球藻Chlorella病毒NYs-1的GpC DNA甲基化酶M.CviPI导入大肠杆菌表达宿主ER2566,高效表达限制酶Pst Ⅰ的基因,再通过简便的Ni亲和、阴离子交换两步层析纯化获得重组限制酶Pst Ⅰ.结果表明,该重组限制酶的蛋白纯度达到90％以上,比活力达到640000 U·mg-1,并具有快速酶切性能,能够在15 min内完成1μg底物λ DNA的消化,达到商业化限制酶PstⅠ的质量标准.

关键词：重组蛋白表达、限制性内切酶、甲基化酶

所属期刊栏目：63

分类号：Q816(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金31470275,31300652;江苏省自然科学基金BK20130406;江苏省高校自然科学基金13KJB180003;江苏省高校优势学科建设工程资助项目

在线出版日期：2017-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：361-367