构建甘蓝型油菜Nsa雄性不育系与NR1恢复系可育后代幼小花蕾的全长cDNA文库
以甘蓝型油菜新型恢复系NR1与不育系杂交后代可育植株幼小花蕾为材料,采用SMART(switching mechanism at 5' end of RNA transcript)技术构建了其全长cDNA文库.原始文库的滴度为5.2X107 pfu/mL,重组率达96%.随机挑取21个噬菌斑,利用PCR扩增插入片段,电泳结果显示其长度集中在0.7~2 kb之间,平均大小约为1.1 kb.采用铺平板法扩增文库,扩增后的文库滴度为4.3×1012 pfu/mL.结果表明,所构建的文库达到了用于分离目的基因的建库要求,为后续恢复基因等重要功能基因全长cDNA的分离克隆奠定了基础.
甘蓝型油菜、新型恢复系NR1、可育植株、幼小花蕾、全长cDNA文库
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Q75(分子遗传学)
国家自然科学基金资助项目30671312;湖北省自然科学基金创新群体项目2008CDA083
2010-11-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
361-366