同源重组法构建枯草芽孢杆菌核黄素操纵子突变株

摘要：

为了解除核黄素合成的反馈调节和提高核黄素的产量,以受体菌的核黄素操纵子为同源重组的指导序列,构建了整合表达载体pB1和pB2,通过双交叉同源重组的方法将线性化的pB1和pB2分别整合到受体菌的染色体上.构建了核黄素操纵子的rfn框和启动子ribPl被pB9启动子替换,并在ribB与ribA基因之间引入PnprE启动子的枯草芽孢杆菌核黄素操纵子突变株GJ04和GJ05.通过PCR方法验证了同源重组的正确性.基因工程菌遗传稳定.能分泌产生核黄素.发酵摇瓶实验结果表明:同源重组突变后的菌株GJ04和GJ05的核黄素产量明显高于具有玫瑰黄素抗性标记的菌株GJ02,发酵72 h分别提高了8.6%和11.2%.

关键词：同源重组、枯草芽孢杆菌、核黄素、操纵子

所属期刊栏目：55

分类号：Q786;S852.61(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家重点新产品计划2003ED760039

在线出版日期：2009-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：354-358