不同复性条件对重组人组织纤溶酶原激活剂复性的影响

摘要：

大肠杆菌生产菌株诱导表达产生的无活性重组人组织纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,tPA)包涵体蛋白,溶解于尿素中变性后进行复性.通过单因子试验和正交试验考察了不同复性条件下透析复性对tPA包涵体蛋白复性效率的影响.结果表明蛋白质浓度、复性温度、pH值、复性介质、还原剂浓度对tPA的复性效果都有不同程度的影响,当0.5 g/L tPA包涵体蛋白溶解于pH 9.5的7 mol/L的尿素,加入5 mmol/L β-巯基乙醇,在20 ℃、pH 8.0的双蒸水条件下复性时,可以取得最高的复性效率(2.0×107IU/g).通过对稀释复性、透析复性和凝胶过滤层析复性3种方法比较,建立了适宜工业化生产tPA的复性方法.

关键词：tPA蛋白、包涵体、复性、正交试验

所属期刊栏目：54

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家科技攻关计划2001BA749C;湖北省科研项目2001AA304B01

在线出版日期：2008-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：462-466