蝎神经毒素AaIT的表达及功能分析

摘要：

在不改变氨基酸编码序列的情况下, 根据大肠杆菌密码子偏爱性, 设计并人工合成了适合于大肠杆菌表达的蝎神经毒素AaIT基因. 将该基因插入到大肠杆菌表达载体PET32a+中, 得到重组质粒PET32a-AaIT, 将该质粒转入带有trxB/gor双突变的大肠杆菌Origami(DE3), 重组菌株经IPTG诱导后,获得可溶性表达产物, 但该表达产物没有生物学活性.把此基因插入到含有AOX1启动子和α分泌信号肽序列的毕赤酵母表达载体pPIC6αA构建重组质粒pPIC6αA-AaIT,转化毕赤酵母(X-33),经甲醇诱导后, 获得高水平的分泌表达(20 mg/L). 表达产物喂食银纹夜蛾及甜菜夜蛾没有表现出生物活性,经注射有活性.

关键词：表达、AaIT、毕赤酵母

所属期刊栏目：51

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2006-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：727-732