表达猪瘟病毒E2基因和gfp报道基因的伪狂犬病病毒双基因转移载体的构建

摘要：

将以PRV gG为启动子,SV40 polyA为加尾信号的CSFV E2表达盒克隆于包含伪狂犬病病毒(PRV)tk基因和gH基因片段的重组质粒pTK2.5,替换掉tk基因的SalⅠ与Xho Ⅰ酶切位点之间的序列.构建了携带CSFV E2基因的转移载体pTKE2.免疫荧光检测证实,转染BHK21细胞的pTKE2在感染PRV的情况下,能表达E2蛋白.采用特异性引物PCR方法扩增gfp表达盒,对酶切位点进行改造,将其克隆到pTKE2的Sal Ⅰ位点,构建了用PRV gG启动子和HCMV IE启动子分别控制E2基因和gfp基因表达、两基因取向相反的双基因转移载体pTKE2.GFP.将双基因转移载体pTKE2.GFP转染BHK21细胞中,12 h后在荧光显微镜下观察到呈绿色荧光的GFP表达.表达的GFP不引起细胞毒性.

关键词：伪狂犬病毒、转移载体、绿色荧光蛋白、E2基因

所属期刊栏目：48

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：湖北省科技攻关项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：466-470