10.3321/j.issn:1671-8836.2001.02.028
大肠杆菌在低Ca2+条件下对外源DNA的摄取
含一定浓度Ca2+的LB培养基,接种大肠杆菌HB101,37 ℃振荡培养至OD600为0.5左右,培养前或培养后加入pBR322质粒,4 ℃放置一段时间后经氨苄青霉素筛选和质粒检测发现,大肠杆菌不经过高Ca2+下的冰浴处理和热激活等过程就能够直接摄取外源DNA;通过对转化子质粒拷贝数和氨苄青霉素抗性测定发现,这种转化方式进入菌体内的质粒DNA同样能够进行有效的复制和表达,与传统的人工转化结果无本质区别;在一定范围内,大肠杆菌的转化频率与环境中的Ca2+浓度成正相关,并且这种准自然条件下的转化需要一定的时间.实验结果对揭示大肠杆菌可能具有自然遗传转化的能力以及正确评估基因工程微生物的安全性具有重要意义.
大肠杆菌、Ca2+、自然遗传转化
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Q939(微生物学)
国家自然科学基金30070408
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
247-250