水稻叶片Ca2+/CaM依赖性蛋白激酶的纯化和活性测定

摘要：

通过高速离心、(NH4)2SO4沉淀、琼脂糖凝胶过滤和CaM-sepharose4B亲和层析,从HPGMR(58S)叶片中初步纯化出Ca2+/CaM依赖性蛋白激酶.纯化的Ca2+/CaM依赖性蛋白激酶经SDS-聚丙烯酰胺凝胶线性梯度电泳,亚基分子量约为55×103.在Ca2+/CaM依赖性蛋白激酶的标准反应体系中,存在过量的ATP,提取磷酸化反应剩余的ATP,用叶绿体Mg2+-ATP酶分解ATP,最后用复合孔雀绿测定无机磷,从而来计算Ca2+/caM依赖性蛋白激酶的活性.实验结果表明,该酶活性是依赖Ca2+和caM的,并且EGTA和TFP对酶活性有明显的抑制作用.

关键词：Ca2+/caM依赖性蛋白激酶、Mg2+-ATP酶、光敏核不育水稻农垦58s

所属期刊栏目：46

分类号：Q555.7;S511.1(酶)

资助基金：中国科学院资助项目39370427

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：751-755